使用奧林巴斯體視顯微鏡 SZ61 觀察水中浮游生物時(shí)，需結(jié)合其格里諾光學(xué)系統(tǒng)的高景深、寬視場(chǎng)特性，以及浮游生物的動(dòng)態(tài)觀察需求。以下為針對(duì)性操作指南與分析要點(diǎn)：

一、樣品采集與預(yù)處理：保持生物活性

采樣策略

表層水采集：使用 25 號(hào)浮游生物網(wǎng)（孔徑 64μm）在水面下 0.5 米處呈 “∞" 形緩慢拖動(dòng) 1-2 分鐘，濃縮樣品至 50mL 標(biāo)本瓶。

分層采樣：深水湖泊需用采水器分表層、中層、底層取樣，標(biāo)記深度（如 “5m 層"）。

樣品固定與濃縮

臨時(shí)觀察：直接取 10mL 水樣，靜置 5 分鐘待生物沉降，用移液槍吸取底部 2mL 至載玻片（避免攪動(dòng)）。

固定保存：若需長(zhǎng)期觀察，加入 1-2 滴魯哥氏液（Lugol's solution）固定（每 100mL 水樣加 5mL），避光靜置 24 小時(shí)后虹吸去除上清液，留 5mL 沉淀。

制片技巧

載玻片制備：在載玻片中央滴 1 滴樣品，覆蓋 22mm×22mm 蓋玻片（先接觸一側(cè)再緩慢放下，避免氣泡）。

防樣品流動(dòng)：若生物游動(dòng)過(guò)快，可在蓋玻片四周涂少量凡士林，或加入 1% 甲基纖維素溶液減緩運(yùn)動(dòng)。

二、SZ61 顯微鏡參數(shù)設(shè)置：優(yōu)化動(dòng)態(tài)觀察

光路與照明

模式選擇：透射光（SZ2-ILST 環(huán)形底光）為主，可調(diào)光闌控制亮度（40%-60%），避免強(qiáng)光導(dǎo)致生物避光或死亡。

對(duì)比度增強(qiáng)：開啟斜射光（通過(guò)底光轉(zhuǎn)盤調(diào)節(jié)角度至 30°），利用格里諾系統(tǒng)的立體感突出浮游生物輪廓（如硅藻的殼紋、輪蟲的附肢）。

放大倍率策略

初篩：10× 目鏡 + 0.5× 輔助物鏡（總 6.7×-45×），快速掃描全視野，記錄優(yōu)勢(shì)類群（如綠藻、枝角類）。

精觀：切換 15× 目鏡（總 10×-67.5×）或 2× 輔助物鏡（總 20×-135×），觀察細(xì)節(jié)（如橈足類的觸角分節(jié)、硅藻細(xì)胞壁的孔紋）。

動(dòng)態(tài)追蹤技巧

開啟載物臺(tái)移動(dòng)尺的微調(diào)功能（最小步距 0.1mm），跟隨快速游動(dòng)的生物（如草履蟲）。

使用視頻錄制功能（搭配 DP27 相機(jī)），后期逐幀分析運(yùn)動(dòng)軌跡或行為模式。

三、分類觀察要點(diǎn)：常見浮游生物識(shí)別

類群形態(tài)特征（SZ61 下典型表現(xiàn)）觀察重點(diǎn)

硅藻（Bacillariophyta）細(xì)胞壁呈對(duì)稱殼狀，具細(xì)密孔紋（如羽紋硅藻的縱溝），運(yùn)動(dòng)時(shí)呈直線滑行殼面花紋（屬種鑒定關(guān)鍵）、色素體顏色（黃綠 / 褐色）

綠藻（Chlorophyta）球形 / 盤形，含綠色葉綠體（如柵藻的片狀葉綠體、衣藻的眼點(diǎn)）鞭毛數(shù)量（衣藻 2 根）、群體排列方式（空球藻呈空心球體）

輪蟲（Rotifera）身體分頭部、軀干、尾部，頭冠具纖毛環(huán)（運(yùn)動(dòng)時(shí)如旋轉(zhuǎn)車輪）咀嚼器形態(tài)（槌型 / 枝型）、趾部結(jié)構(gòu)（錨狀 / 爪狀）

枝角類（Cladocera）身體側(cè)扁，被兩瓣甲殼包裹，第二觸角發(fā)達(dá)呈枝狀（如溞屬）頸溝位置、殼刺數(shù)量（溞屬后背角有殼刺）

橈足類（Copepoda）身體分節(jié)明顯，第一觸角細(xì)長(zhǎng)（雄體呈執(zhí)握狀），尾叉對(duì)稱體節(jié)比例（前體部與后體部界限）、卵囊形態(tài)

四、操作技巧與注意事項(xiàng)

快速計(jì)數(shù)法

采用 “網(wǎng)格計(jì)數(shù)法"：在目鏡中放置 10×10 網(wǎng)格測(cè)微尺，隨機(jī)選取 5-10 個(gè)視野計(jì)數(shù)，取平均值后換算成單位體積數(shù)量（個(gè) / L）。

避免生物聚集

若樣品中生物密度過(guò)高（視野內(nèi)＞50 個(gè)），可用過(guò)濾后的原水稀釋 1-5 倍，確保單個(gè)生物清晰可見。

環(huán)境控制

樣品溫度維持在 15-25℃（可使用加熱載物臺(tái)），避免溫差導(dǎo)致生物活力下降。

觀察時(shí)間不超過(guò) 30 分鐘，防止蓋玻片下氧氣耗盡（必要時(shí)可通過(guò)顯微注射針補(bǔ)充空氣）。

五、典型案例：湖泊浮游生物群落分析

樣品：某富營(yíng)養(yǎng)化湖泊表層水，經(jīng)魯哥氏液固定后取 1mL 制片。

觀察：10× 目鏡 + 1× 物鏡（總 16×）下可見大量綠色球形群體（空球藻，約 200 個(gè) /mL）、少量透明甲殼類（老年低額溞，5 個(gè) /mL），以及硅質(zhì)殼面反光的舟形硅藻（150 個(gè) /mL）。

結(jié)論：綠藻占優(yōu)勢(shì)，提示水體輕度富營(yíng)養(yǎng)化，溞類數(shù)量較少可能與藻類密度過(guò)高有關(guān)。

通過(guò) SZ61 的高景深與寬視場(chǎng)優(yōu)勢(shì)，可實(shí)現(xiàn)浮游生物的活體動(dòng)態(tài)觀察、分類鑒定及定量分析，適用于生態(tài)學(xué)調(diào)查、水質(zhì)監(jiān)測(cè)及教學(xué)研究場(chǎng)景。操作時(shí)需注意保持生物活性，并結(jié)合分類特征逐步細(xì)化觀察。